Иммуноферментный анализ крови: расшифровка, методы

Для того, чтобы определить уровень содержания таких биологически активных веществ, как гормоны в крови, иммунологические комплексы, требуется провести специальное лабораторное исследование. При подозрении на наличие гематологического, инфекционного или поражающего аутоиммунную систему заболевания специалисты назначают анализ крови на ИФА. По ходу статьи мы с вами рассмотрим, что такое иммуноферментный анализ крови, как к нему подготовиться, что он показывает и как его расшифровать самому.

Общие представления

Что же это за исследование – анализ крови на ИФА? Аббревиатура расшифровывается как иммуноферментный анализ крови, в ходе которого определяется количественное и качественное содержание различных биологически активных веществ, а также антител и антигенов в биологическом материале.

Механизм проведения ИФА

Что используется при иммуноферментном анализе крови:

кровь из вены;
спинномозговая жидкость;
слизь уретры, цервикального канала;
околоплодная жидкость;
содержимое стекловидного тела.

Иммуноферментный анализ назначают с целью диагностирования заболеваний, которые передаются половым путем, инфекционных и онкологических процессов, аллергических реакций, расстройств в работе эндокринной и репродуктивной системах, аутоиммунных и иммунодефицитных заболеваний, а также для оценивания риска развития некоторых болезней сердечно – сосудистой системы, почек.

Обследование крови на ИФА при беременности назначают с целью раннего выявления уродства плода, нарушений развития на начальных стадиях и контроля их динамики. Кроме того, анализ ИФА позволяет контролировать уровень содержания антител, способных спровоцировать развитие у ребенка тяжелых неврологических расстройств, тем самым предотвращая развитие осложнений не только во время беременности, но и в процессе родов.

Современная диагностика крови дает возможность заблаговременно отреагировать на выявленные проблемы и в значительной мере укрепить здоровье, как самой мамы, так и ее малыша.

Что такое ферментативные реакции?

Ферментативными называются реакции, позволяющие одно вещество превратить в другое. Материал, на который воздействуют в ходе исследования крови методом ИФА, носит название «субстрат», а материал, получаемый под воздействием фермента, носит название «продукт реакции». Причем особенности данного процесса таковы, что воздействовать тот или иной фермент может исключительно на конкретный субстрат. Подобное свойство фермента определять «свой» субстрат носит название «сродство». Исходя из вышесказанного, становится предельно понятно, что с каждым ферментом связана исключительно одна, специфичная исключительно для него реакция.

При этом стоит отметить, что метод ИФА диагностики подразумевает использование не более десятка реакций ферментативного типа, вследствие которых образуются колорированные вещества, позволяющие использовать для определения концентрации возбудителя метод химической реакции – колориметрию.

Преимущества проведения анализа

Преимущества ИФА крови относятся:

высокая (до 90%) степень чувствительности;
возможность раннего установления диагноза, с одновременным определением стадии заболевания;
невысокая стоимость реагентов, а, следовательно, доступность;
минимальное количество материала для исследования;
минимальные сроки получения результата анализа крови;
возможность длительного хранения реагентов;
способность контролировать динамику развития патологического процесса.

Тест-системы
Минусы иммуноферментного анализа:

нельзя конкретизировать возбудителя заболевания, в лаборатории получают только иммунный ответ на него
возможность получения ложного результата (в очень редких случаях, преимущественно в период вынашивания беременности).

Преимущества метода диагностики

Несомненно, иммуноферментный анализ имеет ряд преимуществ по сравнению с другими диагностическими методиками:

С его помощью можно определить даже незначительное наличие патогенных организмов, что говорит о высокой чувствительности теста.
Возможность обнаружения заболевания на самых ранних стадиях, что значительно повышает шанс на благополучное излечение.
Простота и удобство взятия биологического материала. Такой анализ проводят как в частных лабораториях, так и в государственных. При необходимости материал может взять медсестра у пациента дома.
Для анализа требуется совсем незначительный объем биоматериала.
Быстрое получение результата. Современное медицинское оборудование позволяет выполнить анализ в течение суток.
Возможность обнаружения скрытых бессимптомных форм инфекции.
Доступность исследования.
При необходимости возможно проведение массовых обследований данным методом.
Существует возможность отслеживания протекания заболевания и эффективности назначенного лечения, так как можно проводить анализ методом ИФА многократно абсолютно безопасно для пациента.
Автоматизация этапов проведения анализа, что исключает человеческий фактор и повышает достоверность результатов.
Реагенты для проведения ИФА хранятся достаточно долго – около года.
Проведение анализа возможно при колебаниях температуры окружающей среды.

Подготовка

Принцип данного вида исследования крови базируется на образовании в организме человека специфических антител при попадании в него антигенов, то есть чужеродных агентов, вызывающих развитие того или иного заболевания. В результате их взаимодействия образуются комплексы «антиген — антитело», которые и подвергаются исследованию при осуществлении иммуноферментного анализа.

В связи с этим, чтобы не повлиять на данные комплексы и, соответственно, на достоверность полученных результатов, анализ крови и другого биологического материала на ИФА требует определенной подготовки.

Кровь сдают натощак, также за 14 дней до предполагаемого обследования специфическое лечение приостанавливается и употребление антибактериальных, противовирусных лекарственных препаратов прекращается.

Кровь на ИФА сдается из вены. Непосредственно перед забором крови следует ограничить физические нагрузки, а также исключить курение и употребление алкогольных напитков.

Расшифровка ИФА и результат анализа

В бланке результатов анализа крови ИФА расшифровка представлена в виде таблицы, в которой обозначены показатели по отдельным видам антител. Интерпретация результата происходит исходя из сочетаний различных иммуноглобулинов в организме:

IgA	IgM	IgG	IgE	Результат
Не определено	Отрицательно	Не определено	—	Выздоровление
Отрицательно	Отрицательно	Отрицательно	—	Отсутствие иммунитета к инфекции
Отрицательно	Положительно	Положительно	—	Острая стадия инфекции
Отрицательно	Отрицательно	Положительно	—	Наличие естественного или поствакцинационного иммунитета к инфекции
Положительно или отрицательно	Отрицательно	Положительно	—	Хронитизация инфекционного процесса
Положительно	Положительно	Положительно	—	Обострение хронического инфекционного недуга
Положительно или отрицательно	Положительно	Отрицательно	Положительно	Острый гельминтоз
Отрицательно	Отрицательно	Положительно	Положительно	Длительно текущий гельминтоз

Приведенные в таблице значения «положительно» и «отрицательно» являются относительными — если в одной лаборатории он считается нормой, то в другой нормальный показатель будет отличаться в числовом значении. Именно поэтому при необходимости повторного исследования рекомендуется обращаться в одну и ту же лабораторию.

Методика проведения ИФА

Существует несколько методик и способы проведения иммуноферментного анализа: прямой и непрямой способ, конкурентный и метод блокирования.

В основе проведения обследования крови (любого другого биологического материала) на ИФА лежит алгоритм, заключающийся в осуществлении двух реакций – иммунной и ферментативной.

В ходе первой патологические агенты связываются с защитными элементами клеток биологического материала, взятого для исследования. Образуется иммунный комплекс «антиген — антитело». Выглядит это следующим образом. Антигены присутствуют на поверхности абсолютно всех клеток.

При попадании в организм чужеродных клеток происходит их захват иммунными клетками (на чьих поверхностях располагаются антитела), которые сопоставляют данные об антигенах с поверхности вновь поступивших клеток с информацией, заложенной в собственной «памяти». В случае несовпадения этих данных включаются защитные функции организма, заключающиеся в образовании иммунного комплекса.

После этого осуществляют ферментативную реакцию, которая визуализирует результаты предшествующей реакции. Ее принцип основывается на превращении вещества из одного в другое. Для каждого вида ИФА образующего в процессе иммунной реакции материала существует определенный фермент, обработку которым используют для определения концентрации чужеродного агента (по интенсивности окрашивания раствора).

Методика проведения ИФА

Фазы иммуноферментного анализа

В зависимости от предполагаемого заболевания, из набора для иммуноферментного анализа используют необходимый антиген, который во время химической реакции при наличии инфекции свяжется с патогенной флорой. Этот процесс называется проведением иммунной реакции.

Затем для того, чтобы визуально определить результат исследования, проводят ферментативную фазу ИФА. Она предполагает окрашивание материала с помощью специальных реагентов. В данном исследовании применяют такие ферменты, как щелочная фосфатаза, пероксидаза и авидин. В зависимости от получившегося цвета в процессе проведения химических реакций и определяют результат иммуноферментного анализа.

Расшифровка

Благодаря анализу крови на ИФА, лаборанты определяют содержание в анализе крови иммуноглобулинов A, G и M. Положительный результат при исследовании крови (другого биологического сырья) на ИФА дает возможность не только поставить диагноз, но и стадию заболевания, а также характер его протекания (острое или хроническое).

Данные иммуноглобулины при наличии в организме пациента патологического процесса образуются в различные периоды заболевания:

Иммуноглобулины М, IgM – образуются через пять дней после начала заболевания и сохраняются в крови в течение 1,5 месяца, после чего исчезают. Выявление IgM указывает на наличие в организме острого первичного патологического процесса и необходимости усиленного терапевтического вмешательства.
Иммуноглобулины G, IgG – возникают спустя четыре недели с момента инфицирования, их наличие в организме можно выявить на протяжении нескольких месяцев. Выявление IgG указывает на наличие в анамнезе человека перенесенного заболевания. Повышение уровня их содержания может свидетельствовать также о повторном заражении.
Иммуноглобулины А, IgA – появляются в момент заражения и присутствуют в организме в течение четырех недель. Снижение их содержания говорит о начале выздоровления. Появление в анализах вновь после того, как человек прошел курс лечения и выздоровел, свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. Одновременное выявление в результатах ИФА IgA и IgG также говорит о наличии в организме хронического процесса.

Следует также отметить, что одновременное присутствие в анализах IgG и IgМ указывает на то, что хронический процесс обострился, и пациенту требуется начать лечение. Если же ни один из иммуноглобулинов в ходе обследования не был выявлен, это означает отсутствие иммунного ответа.

Что может повлиять на результат

Несмотря на то, что ИФА считается одним из самых точных анализов современности, он может дать ложный отрицательный или ложный положительный диагноз. Ошибочные результаты, к счастью, очень большая редкость, однако небольшие отклонения от реальных показателей случаются примерно в трети случаев.

Повлиять на точность анализа могут:

нарушения норм забора крови на анализ;
нарушения работником лаборатории норм проведения исследования;
наличие не упомянутого в анамнезе ревматизма или иного ревматического заболевания (подобные патологии всегда вносятся в своеобразный «стоп-лист»);

выраженное нарушение обменных процессов;
острое или осложненное течение ВИЧ.

Значимые погрешности могут случаться при несоблюдении пациентом правил подготовки к анализу. Так, сдвиги показателей отмечаются в результатах больных, которые длительное время принимают лекарственные препараты. Незначительно изменяется концентрация различных иммуноглобулинов и при несоблюдении рекомендаций по питанию накануне сдачи крови.

Чтобы избежать ложных результатов, рекомендуется сообщать врачу обо всех хронических заболеваниях, а также о препаратах, от которых нет возможности отказаться на момент сдачи анализа. За сутки до забора крови рекомендуется отказаться от алкоголя, жирной пищи и курения. Анализ нужно сдавать натощак.

Речь в следующем видео пойдет об анализах крови:

peptic.ru